細(xì)胞破碎機(jī)的細(xì)胞粉碎技術(shù)是怎樣的？
細(xì)胞破碎機(jī)的細(xì)胞分裂技術(shù)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁，使細(xì)胞內(nèi)容物釋放目的產(chǎn)物成分的技術(shù)。細(xì)胞破碎分離純化某些蛋白質(zhì)時，先要將蛋白質(zhì)從組織或細(xì)胞中釋放出來，保持原有的自然狀態(tài)，以免失去活性。因此，細(xì)胞破碎機(jī)要用適當(dāng)?shù)姆椒ǚ鬯榻M織和細(xì)胞。不同生物體或同一生物體不同部位的組織，細(xì)胞容易破碎，使用方法也不同。例如，動物器官的細(xì)胞膜比較脆弱，容易破碎，植物和微生物被用于由比較堅(jiān)固的纖維素和半纖維素組成的細(xì)胞壁。
細(xì)胞粉碎技術(shù)是利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁，使細(xì)胞內(nèi)容物釋放目的產(chǎn)物成分的技術(shù)，是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)的重大發(fā)展，蛋白質(zhì)可以大規(guī)模生產(chǎn)。
細(xì)胞破碎機(jī)的粉碎方法可以規(guī)定為機(jī)械法和非機(jī)械法兩大類。
高壓均質(zhì)機(jī)是常用設(shè)備，由產(chǎn)生高壓的正向替代泵(positive displacenemt pump)和排放閥(discharge valve)組成，排放閥有可調(diào)整大小的狹窄孔。細(xì)胞漿通過逆閥進(jìn)入泵內(nèi)，在高壓下，從排出閥門的小孔中高速跳出來，射進(jìn)沖擊圈，突然的減壓和高速沖擊使細(xì)胞被較高的液體剪切力打碎。在操作方式中，可以使用單通、均勻器或多通等，也可以連續(xù)操作。為了控制溫度上升，進(jìn)口處可以用干冰調(diào)節(jié)溫度，使出口溫度控制在20左右。產(chǎn)業(yè)規(guī)模的細(xì)胞破裂中，酵母等難以破碎、濃度高或處于生長停止期的細(xì)胞。
將相同體積的少量組織樣品和能密封高密度ZircoBeads的2ml螺旋蓋微量管內(nèi)，將緩沖液和穩(wěn)定成分放入1.5ml的體積內(nèi)，用6500RPM振動器高速休息8秒，8秒，再振動8秒即可。這種方法是目前較快、一次性處理較多樣品的方法。一臺機(jī)器一天可以處理2400個樣品。對小而多樣的人來說很方便。
高速攪拌珠研磨粉碎方法
研磨是將細(xì)胞懸浮液與玻璃珠、石英砂、氧化鋁等磨料快速混合在一起，粉碎細(xì)胞的一般方法。在工業(yè)規(guī)模的粉碎中，經(jīng)常使用高速球磨機(jī)。超聲波破碎法(ultrasonication)
超聲波破碎法利用超聲波振蕩器發(fā)射的15-25kHz超聲波探頭處理細(xì)胞懸浮液。超聲波振蕩器有多種類型，一般為電音型，由發(fā)電機(jī)和換向器組成，發(fā)生器可以產(chǎn)生高頻電流，換向器的作用是將電磁振動轉(zhuǎn)換為機(jī)械振動。超聲波振蕩器直接插入兩種類型的介質(zhì)，可以分為插槽和探針。
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