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與常規(guī)液相色譜柱相比,Carbomix系列色譜柱在使用上有其特殊性,因此必須嚴(yán)格遵守Carbomix系列色譜柱的操作規(guī)定,以確保Carbomix系列色譜柱的安全使用。
高溫操作:由于Carbomix系列色譜柱需要在固定相充分溶脹的情況下對(duì)化合物進(jìn)行分離,因此一般采用較高的柱溫。并且,柱溫是影響分離效果的重要因素。
其中CarbomixH-NP柱的建議柱溫為55 ℃。用戶可根據(jù)分離情況對(duì)柱溫進(jìn)行優(yōu)化,但需******在CarbomixH-NP柱的工作溫度范圍內(nèi),超出溫度上限(85 ℃)或低于下限(35 ℃)都將可能對(duì)色譜柱造成損傷。
CarbomixCa-NP柱的建議柱溫為85 ℃。用戶可根據(jù)分離情況對(duì)柱溫進(jìn)行優(yōu)化,但需******在CarbomixCa-NP柱的工作溫度范圍內(nèi),超出溫度上限(85 ℃)或低于下限(50 ℃)都將可能對(duì)色譜柱造成損傷。
CarbomixPb-NP柱的建議柱溫為75 ℃。用戶可根據(jù)分離情況對(duì)柱溫進(jìn)行優(yōu)化,但需******在CarbomixPb-NP柱的工作溫度范圍內(nèi),超出溫度上限(85 ℃)或低于下限(50 ℃)將可能對(duì)色譜柱造成損傷。
低壓操作:與常規(guī)液相色譜柱相比,Carbomix系列色譜柱是在較低的壓力下進(jìn)行操作,一般運(yùn)行壓力在500psi以下,不能超過******耐受壓力(見各色譜柱技術(shù)參數(shù)表),超出允許壓力將導(dǎo)致色譜柱的塌陷,因此必須謹(jǐn)慎調(diào)節(jié)流速,嚴(yán)密監(jiān)視壓力變化。
一般使用步驟
1、 使用前應(yīng)******整個(gè)系統(tǒng)的超純水環(huán)境,包括流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶以及整個(gè)液路。用新制的超純水(<18MΩ)沖洗系統(tǒng),沖洗體積約為100ml。
2、 用流動(dòng)相充分沖洗系統(tǒng);對(duì)于Carbomix Ca和Carbomix Pb,流動(dòng)相需為新制超純水。
3、 接入Carbomix系列色譜柱,確保擰緊管線接頭,然后合上柱溫箱。色譜柱前的連接管線推薦使用50 cm以上長(zhǎng)度的金屬管線,以******流動(dòng)相在進(jìn)入色譜柱前被充分預(yù)熱。
4、 將流速設(shè)為0.1ml/min(4.6×300mm)或0.2ml/min(7.8×300mm),開始沖洗色譜柱。同時(shí),將柱溫設(shè)置為樣品測(cè)試溫度,待柱溫升至設(shè)定溫度后再逐漸升高流速至設(shè)定值。流速的設(shè)定需確保色譜柱壓力在安全壓力范圍內(nèi),一般運(yùn)行壓力在500psi以下,不能超過******耐受壓力(見各色譜柱技術(shù)參數(shù)表)。
5、 在所設(shè)測(cè)試條件下,用流動(dòng)相沖洗色譜柱至基線穩(wěn)定。然后進(jìn)行樣品的分析。
6、 使用結(jié)束后,先將流速設(shè)定為0.1 mL/min,再停止柱溫箱加熱,待柱溫降低至40 ℃以下后,停止流速。不可直接關(guān)閉流速或在沒有降低流速的情況下關(guān)閉柱溫,這些都將損害色譜柱。
7、 將色譜柱從柱溫箱中取下,色譜柱兩端擰上堵頭,然后將色譜柱裝入柱包裝盒內(nèi)。
流動(dòng)相注意事項(xiàng)
l 流動(dòng)相中不能含甲醇、四氫呋喃、二甲基甲酰胺等非極性溶劑,這些有機(jī)溶劑將破壞色譜柱固定相。
l Carbomix H應(yīng)在pH 1-3下使用,Carbomix Ca和Carbomix Pb應(yīng)在pH 5-9下使用,在允許pH范圍外使用將對(duì)色譜柱固定相造成破壞。
l 允許流動(dòng)相中添加乙腈等有機(jī)溶劑以改善分離效果,但應(yīng)不高于30%乙腈或5%叔丁醇(或異丙醇)。
注:如還有不清楚的地方,請(qǐng)?jiān)僭敿?xì)閱讀《色譜柱操作說明書》或致成都摩爾科學(xué)儀器有限公司咨詢。