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高壓勻漿機(jī)廠家淺述實驗室勻漿的制備步驟

2025年06月30日 09:58:31      來源:北京華瑞創(chuàng)世科技有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺      閱讀量:10

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高壓勻漿機(jī)廣泛應(yīng)用于科研,醫(yī)療,化工制藥,食品工業(yè)等領(lǐng)域,物料在勻漿杯中通過電機(jī)旋轉(zhuǎn)驅(qū)動旋刀同時進(jìn)行劈裂,碾碎,摻和等過程,是物料攪拌搗碎的過程。
  高壓勻漿機(jī)選用微型電機(jī),電機(jī)驅(qū)動旋刀在瓶杯內(nèi)作用,利用瓶內(nèi)流體力學(xué)和高速機(jī)械剪切力做工。有大小六種瓶、刀、刀軸,并附有六個控溫杯,可根據(jù)物料的需要在杯內(nèi)放入熱水或冷卻液進(jìn)行調(diào)溫,并設(shè)有機(jī)械定位,整個機(jī)件作業(yè)自如方便,電器部分設(shè)有開關(guān),通電指示燈、調(diào)速器可根據(jù)需要轉(zhuǎn)速進(jìn)行無級調(diào)速,外殼設(shè)有接地裝置使用時安全可靠。
  高壓勻漿機(jī)廠家為您講解組織勻漿的制備步驟:
  1.取組織塊(0.2g~1g)zui少可到2~5mg,在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,稱重,放入5或10ml的小燒杯內(nèi)。
  2.用移液管量取預(yù)冷的勻漿介質(zhì)或者用0.86%冷生理鹽水,勻漿介質(zhì)或生理鹽水的體積總量應(yīng)該是組織塊重量的9倍,用移液管或移液器取總量的2/3的勻漿介質(zhì)或生理鹽水于燒杯中,用小剪盡快剪碎組織塊。
  3.勻漿的方式有多種:手工勻漿、機(jī)器勻漿、超聲勻漿、反復(fù)凍融。
  手工勻漿:將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中,再將剩余的1/3勻漿介質(zhì)或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊,一起倒入勻漿管中進(jìn)行勻漿,左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,使組織勻漿化。
  機(jī)器勻漿:用組織研磨機(jī)6m/s研磨制成10%組織勻漿,也可用高壓勻漿機(jī)制備勻漿時間20秒/次,間隙10秒,連續(xù)3-5次。
  超聲粉碎:用超聲波細(xì)胞破碎儀進(jìn)行破碎,可用以振幅12.7mm超聲處理30秒使細(xì)胞破碎。
  反復(fù)凍融:培養(yǎng)或者分離的細(xì)胞可以用以上的方法勻漿,也可以反復(fù)凍溶3次左右,但有部分酶活力會受影響。
  取少量組織勻漿做涂片(直接涂片、染色均可),顯微鏡下觀察細(xì)胞是否磨破,若沒有破則可以延長勻漿時間或增加凍融次數(shù)。
  4.將制備好的10%勻漿用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)3000r/min左右離心10~15分鐘,若檢測ATP酶,則只需要1000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,將離心好的勻漿留下上清棄下面沉淀。
  根據(jù)實驗需要,取適量上清液進(jìn)行各種測定。
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