日常維護(hù)保養(yǎng)

1. 保持貯液瓶清潔，對(duì)專用貯液瓶應(yīng)定期清洗；用試劑瓶作貯液瓶時(shí)，要經(jīng)常更換。定期（如半個(gè)月）在稀硝酸溶液中超聲、清洗過(guò)濾器，保持過(guò)濾器暢通無(wú)阻。

2. 使用HPLC試劑和新蒸二次蒸餾水作流動(dòng)相，所使用的溶劑其截止波長(zhǎng)一定要低于檢測(cè)波長(zhǎng)，對(duì)不是HPLC級(jí)的試劑要進(jìn)行過(guò)濾（HPLC試劑出廠前已用0.02μm濾膜過(guò)濾）。對(duì)流動(dòng)相一定要脫氣。

3. 流動(dòng)相使用不要超過(guò)兩天，尤其是夏天，每天新鮮配制以免微生物的生長(zhǎng)。腐蝕性溶劑或緩沖液在泵內(nèi)存放不可過(guò)夜，否則溶劑會(huì)對(duì)泵起腐蝕作用。使用腐蝕性物質(zhì)后要沖洗，先用水后用甲醇。

4. 每天開(kāi)始使用儀器，注意放空排氣，確保泵頭、流動(dòng)池以及其它流路系統(tǒng)中無(wú)氣泡存在。

5. 珍惜保護(hù)色譜柱，避免柱頭突然產(chǎn)生大的波動(dòng)，擾動(dòng)損傷柱床。如避免泵啟動(dòng)過(guò)速、升壓過(guò)快、樣品閥搬動(dòng)過(guò)慢所造成的柱壓大的波動(dòng)。

6. 采用保護(hù)（警戒）柱，延長(zhǎng)柱壽命。如污染物堆積于保護(hù)柱柱頭，造成柱壓升高，柱效下降，峰形變差時(shí)，卸下用強(qiáng)溶劑反沖后再用或更換新保護(hù)柱。

7. 避免超負(fù)荷進(jìn)樣，對(duì)250×4.6mm的柱子,進(jìn)樣量應(yīng)不超過(guò)100μg。在靈敏度允許的前提下，應(yīng)盡量將試樣濃度降低，減少進(jìn)樣量（進(jìn)樣體積可保持不變），這是保持HPLC柱性能持久良好的重要舉措之一。

8. 經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗柱子，將柱內(nèi)強(qiáng)保留組分及時(shí)洗脫出。反相柱用異丙醇--二氯甲烷（1：1）沖洗，正相（硅膠柱）用純甲醇或異丙醇沖洗，時(shí)間均不少于1h。

9. 做完試驗(yàn)，及時(shí)用適當(dāng)溶劑沖洗柱子和進(jìn)樣閥，尤其是對(duì)過(guò)夜的柱子和進(jìn)樣閥，一定要用足量的水洗凈其中的鹽類、緩沖液，再用甲醇或乙腈沖洗，并保存在乙腈（或甲醇）中。正相柱保存在非極性有機(jī)溶劑（如己烷）中。含鹽流動(dòng)相的沖洗方法：每天操作結(jié)束后，先用純化水或含甲醇5%的水沖洗時(shí)間約20～30分鐘，再用純甲醇沖洗約30～60分鐘（注：不能直接用有機(jī)溶液沖洗，鹽類易析出，堵塞色譜柱，造成色譜柱性損壞；所用水是重蒸餾的水，必須抽濾和脫氣）。不含鹽的流動(dòng)相沖洗方法：每天操作結(jié)束后，先用流動(dòng)相沖洗約10～15分鐘，再用含5%甲醇的水沖洗10～20分鐘，最后用純甲醇沖洗，時(shí)間約20～30分鐘（注：不能直接用純水沖洗，易造成流動(dòng)停止）。

10. 以硅膠為基質(zhì)的柱子，如C-18、C-8等，要控制好流動(dòng)相的pH值，一般不要低于2.5，不高于7.0。pH＞8會(huì)使硅膠骨架溶解；pH＜2則鍵合相化學(xué)鍵易剝離。

11. 盡量用流動(dòng)相溶解樣品，一是避免出現(xiàn)拖尾峰、怪峰，二是避免試樣在系統(tǒng)中由于溶解度降低而析出。

12. 用HPLC分析酸堿性物質(zhì)，由于吸附作用（次級(jí)保留）使峰形拖尾。加入改良劑可以大大改善峰形，提高積分的準(zhǔn)確度。一般規(guī)則是：①分析酸性物質(zhì)，可加入1%有醋酸；②分析堿性物質(zhì)，可加入10-20mmol/L三乙胺；③酸堿物質(zhì)混為一體，可同時(shí)加入1%的醋酸和10-20mmol/L三乙胺。

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