傳統(tǒng)蛋白分析的Western實驗技術,通過電泳區(qū)分不同的組分,并轉移至固相支持物,通過特異性試劑(抗體)作為探針,對靶物質進行檢測,蛋白質的Western印跡技術結合了凝膠電泳的高分辨率和固相**測定的特異敏感等多種特點,可檢測到低至1~5ng(*低可到10-100pg)中等大小的靶蛋白。
由于操作步驟多,操作繁瑣,每一步的失誤都會造成全盤失敗,從而重復實驗,對于珍貴樣品,更是要倍加小心。另外,試驗流程長,結果重復性差,要達到好的實驗結果,成本也會很高。
因此,自從它誕生30多年來,如何使實驗簡單化(Simple)一直是技術發(fā)展的瓶頸,科學家們一直在尋找一種革新的技術來克服Western傳統(tǒng)技術的不足,發(fā)揚它的優(yōu)勢,直到2011年底,專門從事蛋白質分析研究技術的美國ProteinSimple公司(原有名的ALPHA INNOTCHE公司)經(jīng)過多年開發(fā),在推出****的*新蛋白分析專家——全自動Western Blot分析系統(tǒng)Simon,從而使Western實驗變得簡單,高效。該系統(tǒng)實現(xiàn)在同一根樣品管中,從400nL樣品中分離、捕獲、固定蛋白質,繼而進行后續(xù)的**檢測分析。自動運行加樣、分離、固定蛋白、**檢測和化學發(fā)光檢測,無需人工干預。
Simon采用革新的技術傳統(tǒng)Western Blot分析,實現(xiàn)在同一根樣品管中,從400nL樣品中分離、捕獲、固定蛋白質,繼而進行后續(xù)的**檢測分析。
Simon系統(tǒng)采用12根長5cm,內(nèi)徑100um的微量樣品管,結合磚利的內(nèi)涂布技術,可以實現(xiàn)在同一根樣品管中,從400nL樣品中分離、捕獲、固定蛋白質,繼而進行后續(xù)的**檢測分析。該系統(tǒng)可同時分析盛放于一塊酶標板上的12個細胞裂解樣品,與樣品相應的抗體也置于同一塊酶標板上。**分析采用化學發(fā)光法檢測和定量目標蛋白。軟件設計,用戶可定義樣品,選擇檢測方法,自動運行加樣、分離、固定蛋白、**檢測和化學發(fā)光檢測,無需人工干預(更多信息請登錄)。目前,還沒有其他任何一種技術能夠做到用如此微量的樣品同時進行物理分離和**分析檢測。
主要技術和性能規(guī)格要求
1、可自動進行各種蛋白質樣品分離、**檢測,定性和定量分析,廣泛應用于:蛋白質性質鑒定、蛋白質定量分析、蛋白質功能研究、蛋白質修飾和差異表達研究、抗體研究等多個領域
2、全自動Western Blot分析
3、系統(tǒng)自動加樣,避免實驗過程中的人為誤差
4、根據(jù)分子量大小自動進行蛋白質分離
5、無需繁瑣、混亂的制膠、跑膠過程,減少操作程序,避免污染
6、無需轉膜,減少實驗步驟,避免樣品損失,提高結果的準確率和重復率
7、采用磚利技術進行蛋白質捕獲及固定
8、系統(tǒng)自動進行一抗、二抗孵育,自動進行**和化學發(fā)光檢測步驟
9、系統(tǒng)自動完成數(shù)據(jù)采集過程
10、軟件設計,客戶可定義樣品,設置檢驗流程和分析運行數(shù)據(jù)
11、軟件可對結果自動進行**的定量分析
12、一次可運行1~12個獨立樣品
13、單個樣品上樣量為~5ug
14、單個樣品上樣體積~5ul
15、反應管體積400nl
16、一次運行時間3-5個小時
17、靈敏度:ng級
18、動態(tài)范圍:3 logs
19、結果具有高度重復性,CV≤10%
20、可置于工作臺面上,方便操作
*新蛋白分析專家——全自動Western Blot分析系統(tǒng)Simon,采用革新的Simple Western技術了傳統(tǒng),它利用的微量樣品管定位及分析技術,結合化學發(fā)光檢測原理進行納米級的自動化實驗,避免了人為操作誤差,有效提高檢測結果的**性和重復性。