細胞分選是細胞生物學、分子生物學*重要的技術(shù)方法及必要前提，根據(jù)細胞的類型及后續(xù)試驗?zāi)康模壳凹夹g(shù)比較成熟且應(yīng)用較廣泛的主要有：密度梯度離心法、**密度離心法、**磁珠法和流式技術(shù)等。隨著科技的不斷進步，相信各種方法越來越完善，同時一些新的方法也在研究之中，如微芯片CHIP技術(shù)。
其中，**磁珠技術(shù)因具有特異性好、靈敏度高、分選速度快、使用方便、成本低、應(yīng)用廣等特點，自應(yīng)用推廣以來受到廣泛而大量的應(yīng)用，目前已經(jīng)成為*主要的細胞分選方法。
本文以問答的方式，就**磁珠細胞分選過程中常見的問題略做說明，希望能給您帶來些幫助！
首先，了解**磁珠技術(shù)的原理：
1、基于抗體對抗原的特異性識別；
2、磁性微珠直接或者間接偶聯(lián)在抗體上，從而與細胞相連進行標記（如下圖）；
3、在高強度、梯度磁場中標記的細胞被磁性吸附，未標記細胞首先流出，然后洗脫被吸附的細胞（陽性分選）達到細胞磁性分離的目的。
下面我們了解關(guān)于**磁珠細胞分選過程中常見的問題：
1、都能分選哪些細胞？
答：理論上可以分選所有的細胞，但需要根據(jù)所分選細胞的特性開發(fā)出相應(yīng)抗體的磁珠。實際上，目前市場上已經(jīng)進行能夠購買到幾乎所有常用的細胞分選磁珠（市場上應(yīng)用*多的為德國美天旎Miltenyi磁珠，種類*為齊全）。
2、需要哪些設(shè)備和試劑耗材？
答：需要的設(shè)備有：分選器（提供磁場）、分選架（為分選器提供支撐的支架）；所需耗材有：分選柱（細胞分離及洗脫的容器）和磁珠。根據(jù)分選方式、分選量以及操作方式德國美天旎Miltenyi提供多種類型分選器（Mini**磁珠、Midi**磁珠、Mini&Midi**磁珠、Super**磁性細胞分選儀、Vario**磁性細胞分選儀以及autoMACSTM Pro全自動**磁珠分選儀），其中手動方法分選*常用的的是Mini&MidiMACS分選器，autoMACSTM Pro全自動**磁珠分選儀則大量應(yīng)用于醫(yī)院等大量分選細胞的單位。
3、分選柱是否可重復(fù)使用？
答：分選柱屬耗材，不可長久重復(fù)使用，可處理后重復(fù)使用2-5次。處理方法：將長試管注滿PBS，回抽柱子的活塞，倒出回抽液。倒入新的PBS，打出之；重復(fù)兩次---此時基本上將柱子內(nèi)的雜細胞除盡。再抽、打兩三次或95%酒精，然后置于50-60度烘箱，過夜，即能防止生銹。
4、一支分選柱能分選多少細胞？
答：根據(jù)柱子種類不同，具體能分選的細胞數(shù)目同，基本數(shù)量應(yīng)在107～1010間。詳細信息請咨詢經(jīng)銷商或查看說明書材料。
5、一瓶磁珠能使用多久？或能分選多少細胞？
答：一瓶2ml裝大約可以分選109個細胞。
6、分選的細胞純度是多少？
答：良好的實驗條件及正確的操作下，一般的純度都在90%以上。
7、一次分選所需時間？
答：手動操作在30分鐘內(nèi)可完成分選，自動分選2.5-10分鐘即可。
8、分選后的細胞可以進行哪些應(yīng)用？
答：美天旎MiltenyiMACS技術(shù)，不活化細胞，不改變細胞功能，分選細胞活性好，可用于進一步的細胞培養(yǎng)或細胞與分子水平的分析。
9、與Veridex公司的Cellsearch 系統(tǒng)的區(qū)別是什么？
答：兩者作用和應(yīng)用范圍都不相同。美天旎Miltenyi**磁珠分選技術(shù)主要是對細胞進行分選，使用簡單，操作便利，幾乎可應(yīng)用到所有的細胞，且設(shè)備與耗材價格更能普及；而Cellsearch 系統(tǒng)主要是應(yīng)用于外周血循環(huán)腫瘤細胞的分析，其CellTracks®AutoPrep®系統(tǒng)本身即是一個全自動**，能很好的富集CTC，
而CellTracks®Analyzer II系統(tǒng)是一臺光學分析系統(tǒng)屬于細胞分析儀器，所以Cellsearch 系統(tǒng)是為臨床檢查、診斷服務(wù)的醫(yī)療設(shè)備，儀器耗材的價格昂貴，適用CTC的分選試劑（磁珠抗體）種類單一，不能廣泛應(yīng)用于細胞分選實驗。
10、 有哪些不足？或不能進行哪些分選？
答：主要有兩種細胞不能分選：a、不能根據(jù)細胞大小分選細胞；b、不能分選在胞內(nèi)表達某種蛋白的活細胞（GFP等）。
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