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液相色譜柱常見問題

2025年01月10日 08:14:33      來源:成都摩爾科學(xué)儀器有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺      閱讀量:17

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新C18柱的活化及應(yīng)用
   飯相色譜柱也叫C18色譜柱。在化學(xué)分析行業(yè)中得到廣泛的應(yīng)用。
    色譜柱的活化,說白了***是一個平衡的過程。不光是流動相要平衡,。有些時候我們還得對要測試的樣品對新柱子進(jìn)行平衡。還有,測試分子量很高的多肽更為重要,因為分子量高的物質(zhì)擴(kuò)散速度很慢,平衡的話時間也相對比較長,平衡的方式比較簡單,樣品多進(jìn)幾次,等到峰的面積和時間穩(wěn)定在進(jìn)行正式進(jìn)樣測試。
  假如是要加速平衡的時間,那***直接把前面要測試的樣品濃度加大或者不等洗脫完畢,連續(xù)多進(jìn)樣多針,使用要測試的物質(zhì)對新柱進(jìn)行平衡,***能加快平衡時間了。
分子量多肽不高的話 我們一般選擇C18色譜柱***能很好的測定。也有用離子交換柱,親水作用色譜柱,水性C18色譜柱等。、

2、氨基柱柱效的恢復(fù)
氨基柱在進(jìn)酸性樣品時,很傷柱子,如使用一段時間后,柱效降低,峰形改變,如何恢復(fù)?
氨基柱測酸性樣品,應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。
液相色譜柱

建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。
3、色譜柱技術(shù)
色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗積累。
液相色譜柱裝填實(shí)際上是有一定技巧和程序,可能還有一些運(yùn)氣。一般使用高壓勻漿方法裝填。也***是能讓填料在溶劑內(nèi)均勻地懸浮。然后用瞬間高壓壓實(shí),這實(shí)際上用到了不同比例的勻漿液體,和合適的壓力。壓力太大,顆粒破碎,壓力太小,塔板數(shù)少。同時壓力需要穩(wěn)定,不然分布不均,拖尾嚴(yán)重。同時還有頭上平整程度。套上套,***可以用了。

國內(nèi)和國外相比,色譜柱的差距在于:國內(nèi)公司以前都不會自己開發(fā)填料,一般買國外現(xiàn)成填料裝柱,買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因為裝柱歷史短,經(jīng)驗積累少,裝柱工藝也沒有******達(dá)到國外水平。另外,對色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠,國產(chǎn)的還不過關(guān),在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產(chǎn)品相比,差距很大。


4、色譜柱的清洗和保護(hù)

  色譜柱如果被污染了。***把污染的地方取出然后裝上一些填料。因為如果你把色譜柱臟的地方掛掉了。那么微觀的理論塔板數(shù)***少了。如果你刮的不多的話,僅僅是看起來的表明層次。也許***是刮的臟污,所以你把問題解決了。但是今后還是會遇見相同的問題。再刮或者不小心刮的話可能會影響柱子的分析效果,。成都摩爾科學(xué)儀器有限公司提醒******還是裝一個預(yù)裝柱

一般工作完畢之后把色譜柱取下來的時候我們需要做什么?

     答:對于一般的反相色譜柱,我們把他洗干凈之后放到純甲醇里面。然后用東西把柱子的兩頭都賽緊,避免里面的物質(zhì)揮發(fā)。不需要做太多的其他保護(hù)


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