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| 因?yàn)榭萍嫉陌l(fā)展，顯微鏡以及不只是科研領(lǐng)域會(huì)使用的儀器了，很多醫(yī)療甚至生產(chǎn)行業(yè)也會(huì)使用到顯微鏡，那么關(guān)于顯微鏡你都了解多少呢？這篇文章來說些你可能不知道的顯微鏡的基本知識(shí) 一、顯微鏡接物鏡頭上的標(biāo)志含義 1、鏡頭種類和放大倍數(shù) Splan10xSplan40xSplan100x(平場消色差) 2、 鏡口率(數(shù)值孔徑) N.A表示 N.A0.25(低) N.A0.65(高) N.A1.25~1.40(油) 3、鏡筒長度(mm) 160/—160/0.17，160/0.17(蓋片厚度) 4、色條標(biāo)記:白100;藍(lán)40;綠20;黃10  二、顯微鏡的精度 1、齊焦精度：鏡頭轉(zhuǎn)換應(yīng)該在一個(gè)平面上; 2、 定位精度：鏡頭轉(zhuǎn)換應(yīng)該在一個(gè)視野中;使用不當(dāng)破壞精度 3、合軸調(diào)節(jié)：目鏡、物鏡、聚光器應(yīng)該在一個(gè)光軸上，縮小聚光器光環(huán)到最小，旋轉(zhuǎn)聚光器螺絲，調(diào)節(jié)到正中。 3個(gè)數(shù)據(jù)使用不當(dāng)都影響觀察質(zhì)量，效果受到影響。所以觀察不清楚，拍照照片效果不佳與精度合軸不當(dāng)有關(guān)。 三、 鏡口角 鏡口角：接物鏡鏡頭接觸，從標(biāo)本射過來的光線，伸展到接物鏡下組透鏡邊緣所張的角。 以“α”表示。10×N.A :0.25=30° 40×N.A:O.65=80° 100N.A:1.25=110 ° 四、鏡口率(數(shù)值孔徑) 鏡口率是指光線從聚光器經(jīng)過蓋片，所引起折射后所形成光錐底面積的孔徑數(shù)值，又稱數(shù)值孔徑，通常以N.A 表示，刻在接物鏡和聚光器的外側(cè)。 1.它是判斷接物鏡和聚光器的重要依據(jù)，是判斷顯微鏡優(yōu)良的標(biāo)準(zhǔn)。 2.顯微鏡質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)決定鏡口率高低，不決定放大倍率大小。 五、鏡口率的定義 鏡口率是鏡口角半數(shù)的正弦和媒介質(zhì)曲折率兩者的乘積。公式： N.A== n . Sinα/2 n ：介質(zhì)折射率(空氣1;水1.33;油1.515) α：鏡口角 六、利用介質(zhì)提高鏡口率 設(shè)鏡口角 90° 空氣: 1× Sin1/2 =0.707 水侵 : 1.33 × 0.77==0.94 油 侵：1.515 × 0.707==1.071 改變介質(zhì)藉以提高分辨率(兩點(diǎn)之間距離)，決定觀察物體的精度與效果，研究者力求改變介質(zhì)，提高精度。 七、增加鏡口角為110度 設(shè)鏡口角 110° 空氣: 1× Sin1/2=0.707 空氣：N.A==1×0.8251 ≈0.83微米(物體大小) 水浸：N.A== 1.333×0.8251==1.11微米 油浸：N.A==1.515 ×0.8251==1.25微米 要提高分辨率必須： 1.增加鏡口角;2.增大介質(zhì)折射率。 八、普通視頻顯微鏡和光學(xué)顯微鏡的分辨率極限 α <180. Sinα/2<1 干燥系物鏡鏡口率<1，在0.04~0.95之間 油浸物鏡鏡口率提高0.83~1.25 目前油鏡鏡口率為1.40;顯然可以提高分辨率 九、顯微鏡的分辨率 分辨率，鑒別力，分辨本領(lǐng); 分辨率：顯微鏡分辨被檢物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)的能力。它與“分辨距離”成反比，分辨的距離越小，顯微鏡的分辨率越高。 分辨率(R )公式：R=λ/2 N.A=波長/2鏡口率 十一、分辨率計(jì)算 低倍N.A =0.28; 高倍=0.65;油浸=1.25 波長0.55(黃色全波長) R=0.55/2×0.28=0.55/0.56=1μ(物體大小) R=0.55 /2×0.65=0.55/1.3=0.42μ R=0.55/2×1.25=0.55/2.5=0.22μ 如果R=0.55/2×1.40= 0.55/2.8=0.19μ 鏡口率越大，分辨率越高，物鏡的價(jià)值越優(yōu)。 十二、如何提高顯微鏡分辨率1 1、提高鏡口率; 波長0.55;N.A1.4，則R=0.55/2×1.4=0.2微米 普通顯微鏡的分辨率極限 0.2微米 2.縮短波長紫外線光，則R=0.27/2×1.4=0.1微米 可提高分辨率一倍(熒光顯微鏡) 采用更短X，γ射線，電鏡電子流波長0.0387A 十三、如何提高顯微鏡分辨率2 3、改變顯微鏡的射入方式，以直射改為斜射，暗地映光顯微鏡，提高分辨率一倍，觀察活體。 4、改短波的結(jié)構(gòu)，波峰升高;降低波谷，使用1/2波峰或波谷，從而提高分辨率，如相差顯微鏡。1952年獲、諾貝爾獎(jiǎng)。分辨率0.1微米(活體，正負(fù)相差) 5、采用1/4波長提高分辨率，如微分干涉顯微鏡 波長/2相位板的作用 十四、暗視野顯微鏡介紹 普通顯微鏡其照明光線從標(biāo)本下方經(jīng)過聚光器匯聚后透過標(biāo)本，進(jìn)入物鏡，它適用于觀察對光可透的標(biāo)本。若利用斜射光照射物體，使直射光線不能直接進(jìn)人物鏡，只有標(biāo)本經(jīng)斜射照明后發(fā)出的反射光可進(jìn)入物鏡，這樣在顯微鏡下可見到暗視野中明亮的物像。利用暗視野顯微鏡可以觀察到標(biāo)本的細(xì)微部分，如細(xì)菌鞭毛的運(yùn)動(dòng)和梅毒螺旋體、奮森氏螺旋體。 聚光器的區(qū)別：暗視野顯微鏡和一般的明視野顯微鏡區(qū)別只在于二者的聚光器不同，暗視野聚光器可阻止光線直接照射標(biāo)本，使光線斜射在標(biāo)本上。常用的暗視野聚光器有拋物面聚光器、心形聚光器和同心球面聚光器。 調(diào)焦范圍:載物臺(tái)垂直運(yùn)動(dòng)由滾柱(齒條—小齒輪)機(jī)構(gòu)導(dǎo)向，采用粗微同軸旋鈕， 粗調(diào)行程每一圈為36.8mm，總行程為25mm，微調(diào)行程為每圈0.2mm，。有的顯微鏡具備粗調(diào)限位器和張力調(diào)整環(huán) 結(jié)語：我是以“彎背為橋，站立為梯，橋之為道，梯之望理”告訴我整理資料。 每人的手機(jī)或是計(jì)算機(jī)，日常使用中能夠發(fā)揮效能，最多30%就不錯(cuò)了，能夠使用就心滿意足了，不去深入。而顯微鏡就不同了，我們要發(fā)揮效能，探索微觀世界的奧秘，要在復(fù)雜的條件下，區(qū)別細(xì)微結(jié)構(gòu)，就不能不要求把儀器調(diào)整到效能，取得效果，即使非常好的顯微鏡調(diào)節(jié)精度不夠，拍照的結(jié)果卻不盡人意，其原因是基礎(chǔ)知識(shí)與技術(shù)水平的提高。 (責(zé)任編輯：安尼儀器) |
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