中文名稱(chēng)：牛病毒性腹瀉病毒抗體(p80)競(jìng)爭(zhēng) ELISA 檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：Bovine Viral Diarrhea virus (p80) Competitive ELISA antibody test kit

作用與用途

通過(guò)檢測(cè)牛血清樣品中的牛病毒性腹瀉病毒抗體水平。

試劑盒組成

組成成份1*96T2*96T5*96T

抗原包被板1  塊（96 孔/塊）2  塊（96 孔/塊）5  塊（96 孔/塊）

酶標(biāo)抗體1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）1  瓶（60ml/瓶）

20X 洗滌液1  瓶（30ml/瓶）1  瓶（60ml/瓶）2  瓶（60ml/瓶）

陽(yáng)性對(duì)照1  管（0. 1ml/管）1  管（0.2ml/管）1  管（0.5ml/管）

陰性對(duì)照1  管（0. 1ml/管）1  管（0.2ml/管）1  管（0.5ml/管）

底物 A 液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

底物 B 液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

終止液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

說(shuō)明書(shū)1  份1  份1  份

板貼3   張6   張15   張

操作步驟與判定

1.操作步驟

1. 1 試劑準(zhǔn)備：20X 洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋成 1X 洗滌液（即 1 份 20X 洗滌液加入 19 份蒸餾水）。

1.2 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：取出包被板，記錄好樣本的位置。如需使用部分板條，則將需要的板條拆下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將剩余的板條置于 2-8℃干

燥保存。

1.3 加樣/對(duì)照：分別將 20µl 待檢樣品和陰、陽(yáng)性對(duì)照加入到抗原包被板孔內(nèi)，其中陰、陽(yáng)性對(duì)照各加 2 孔；注意每個(gè)樣品使用不 同的吸頭。

1.4 加酶：每孔加入 80ul 酶標(biāo)抗體 ，輕輕振蕩混勻 ，封板后置于 37℃溫育 30 分鐘。

1.5 洗滌：棄去孔內(nèi)液體 ，每孔加入 300µl 1X 洗滌液 ，洗滌 4 次 ，在最-后一次 1X 洗滌液棄去后 ，將孔中殘留的 1X 洗滌液拍干。

1.6 顯色：每孔先加入 50µl 底物 A 液 ，再加入 50µl 底物 B 液 ，輕輕振蕩混勻 ，封板后置于 37℃溫育 15 分鐘。

1.7 終止：每孔加入 50µl 終止液 ，輕輕振蕩混勻 ，測(cè)定 OD450nm波長(zhǎng)處各孔的吸光值。

2.判定

2. 1 實(shí)驗(yàn)成立條件 ：陰性對(duì)照 OD450nm 平均值-陽(yáng)性對(duì)照 OD450nm 平均值≥0.3。

如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果不成立 ，有可能是實(shí)驗(yàn)操作失誤造成的 ，應(yīng)按操作步驟進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

2.2 S/N 值=    陰性對(duì)照 OD450nm 均(待測(cè)樣品 OD450nm 值)值    

2.3 結(jié)果判定 ：S/N 值≥0.3 ，判為陰性； S/N 值＜0.3 ，判為陽(yáng)性。

3.注意事項(xiàng)

3. 1 試劑盒嚴(yán)禁凍結(jié) ，試劑盒從 2-8℃冰箱中取出后需室溫放置 30 分鐘以上 ，完-全恢復(fù)至室溫方可使用 ，使用后應(yīng)立即密封放置

2-8℃保存。

3.2 使用前需確認(rèn)試劑盒有效期 ，應(yīng)在有效期內(nèi)使用。

3.3 所有試劑嚴(yán)禁接觸皮膚和粘膜 ，檢測(cè)結(jié)束后所用耗材按國(guó)家規(guī)定進(jìn)行無(wú)害化處理。

3.4 底物 B 溶液變藍(lán)，則不能使用。

3.5 每個(gè)血清樣品 1 個(gè)吸頭 ，避免交叉污染。

3.6 待檢血清樣品數(shù)量較多時(shí) ，應(yīng)盡量縮短加樣時(shí)間。

3.7 終止反應(yīng)后立即用酶標(biāo)儀讀數(shù)，應(yīng)在 10 分鐘內(nèi)完成。

3.8 所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)滅活處理。

3.9 嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作步驟操作。

3. 10 僅用于科研或遵守當(dāng)?shù)胤煞ㄒ?guī)。

規(guī)格

1*96T/盒 ，2*96T/盒 ，5*96T/盒

貯藏條件及有效期

2～8℃保存 ，有效期為 12 個(gè)月。