【產(chǎn)品名稱】

通 用 名  豬流行性腹瀉病毒IgG ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

英 文 名  ELISA Kit for Detection of IgG against Porcine Epidemic Diarrhea Virus  

【主要組分與含量】

組分含量含量含量

(1)抗原包被板1板2板5板

(2)陽(yáng)性對(duì)照1ml*1（藍(lán)蓋）1.5ml*12ml*1

(3)陰性對(duì)照1ml*1（紅蓋）1.5ml*12ml*1

(4)酶標(biāo)記物11ml*1（綠蓋）25ml*160ml*1

(5)樣品稀釋液25ml*1（藍(lán)蓋）50ml*1150ml*1

(6)20倍濃縮洗滌液25ml*1 (黃蓋)50ml*1150ml*1

(7)底物顯色液11ml*1（棕蓋）20ml*150ml*1

(8)終止液6ml*1 (紅蓋)11ml*126ml*1

(9)血清稀釋板1板2板5板

(10)說(shuō)明書(shū)1份1份1份

【作用與用途】  用于檢測(cè)豬血清中流行性腹瀉病毒IgG抗體。

【注意事項(xiàng)】

（1）實(shí)驗(yàn)前，將試劑盒取出置25℃±3回溫，至少30分鐘，實(shí)驗(yàn)完成后置2～8℃保存。

（2）若試劑盒陰陽(yáng)性對(duì)照、酶標(biāo)記物出現(xiàn)少量懸浮物，屬正常現(xiàn)象。

（3）請(qǐng)?jiān)谠噭┖幸?guī)定的有效期內(nèi)使用；禁止非同批試劑盒混用。

（4）沒(méi)有用完的抗原包被板應(yīng)貯存在密封塑料袋內(nèi)，置2～8℃存放。

（5）避免底物液暴露于強(qiáng)光，避免接觸氧化劑。

（6）濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

（7）嚴(yán)格按照操作程序，仔細(xì)的吸液、計(jì)時(shí)，充分洗滌，對(duì)于獲得精確的結(jié)果是非常必要的。

（8）使用樣品稀釋板將所有待檢血清稀釋好，再進(jìn)行檢測(cè)。

【用法與判定】  

1  用法

1.1  樣品準(zhǔn)備  取動(dòng)物全血，4000r/min離心10分鐘，收集上清。或采集血液，待凝固后自然析出血清。血清清亮，無(wú)溶血。

1.2  樣品稀釋  將待檢血清樣品在樣品稀釋板中按1:40的比例稀釋（例如：在樣品稀釋板中先加入195μl樣品稀釋液，加5μl待檢血清。不同的樣品要注意換吸頭。樣品在稀釋過(guò)程中要充分混勻。陰性、陽(yáng)性對(duì)照不稀釋，直接使用。

1.3  洗滌液配制  10倍濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（20~25℃），然后用蒸餾水或純水作10倍稀釋，混勻（例如：10ml的濃縮洗滌液加上90ml純水）。

1.4  操作步驟

1.4.1  取抗原包被板（根據(jù)樣本多少，可拆開(kāi)分次使用），每孔加入稀釋好的樣本100μl；另外設(shè)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各2孔，100μl/孔。置37℃孵育30分鐘。

1.4.2  棄去板中液體，每孔加入稀釋好的洗滌液300µl，棄掉孔中洗滌液，重復(fù)洗滌5次，拍干。

1.4.3  每孔加入100μl酶結(jié)合物，輕微振蕩混勻。置37℃孵育30分鐘。

1.4.4  棄去板中液體，洗滌5次，方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加底物顯色液100µl，室溫（20~25℃）避光顯色10分鐘。

1.4.6  每孔加終止液50µl。10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定并記錄各孔在450nm波長(zhǎng)處的吸光度（OD）值（測(cè)定前輕輕振勻，勿溢出）。

2  判定

2.1  成立條件  在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔的OD450nm值。試驗(yàn)成立的條件是：陰性對(duì)照孔平均OD450nm值應(yīng)＜0.5，陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD450nm值應(yīng)＞0.5。

2.2  判定標(biāo)準(zhǔn)  

    S為樣品孔OD450nm值，P為陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD450nm值，計(jì)算樣品S/P值。

若S/P值≥0.2時(shí)判為陽(yáng)性；若S/P值＜0.2時(shí)判為陰性。

【規(guī)格】  96孔/盒或192孔/盒或480孔/盒

【貯藏與有效期】  2~8℃保存，有效期為12個(gè)月。